Diagnoza bezpośrednia za pomocą analizy DNA zespołu łamliwego chromosomu Q umysłowego opóźnienia czesc 4

Nazwaliśmy ten wzór mozaiką , ponieważ osoby niosące ją mają dwie populacje komórek, które różnią się pod względem rodzaju mutacji. Podwójne trawienie EcoRI i EagI
Ryc. 3. Ryc. 3. Wykrywanie Mutacji Delikatnych X i Wzorce Metylacji w DNA trawionym EcoRI i EagI. DNA leukocytów został jednocześnie strawiony do końca za pomocą EcoRI i EagI. Rozmiary są wskazane po lewej stronie dla niektórych zmutowanych fragmentów i dla prawidłowych fragmentów na aktywnych i nieaktywnych chromosomach X (odpowiednio 2,8 i 5,2 kb). . oznacza wzrost rozmiaru zmutowanych fragmentów. Wzory hybrydyzacji są identyfikowane po prawej stronie. Cięcie oznacza zmarłego członka rodziny. Aby zapoznać się z objaśnieniem innych użytych symboli, patrz legenda na rys. 2. Smugi na ścieżkach 6 i 16 były blady. Hybrydyzacja tych próbek do sondy kontrolnej (patrz rozdział Metody ) dowiodła, że te ścieżki zawierają tyle DNA, co inne i nie wykazują artefaktu migracji.
Przeanalizowaliśmy rodziny z zespołem łamliwego chromosomu X poprzez podwójne trawienie DNA EcoRI i EagI, proces, który ujawnia zarówno obecność mutacji, jak i status metylacji (EagI nie jest w stanie wyciąć DNA, jeśli jego miejsce restrykcyjne wzbogacone w CpG jest metylowane ). Wyniki przedstawiono na Figurze 3. W podwójnym trawieniu StB12.3 hybrydyzował u wszystkich normalnych osób z fragmentem EcoRI-EagI o wielkości 2,8 kb odpowiadającym aktywnemu chromosomowi X (Fig. 3, ścieżki 2, 4, 5 i 14 ); u samic hybrydyzował on również z dodatkowym fragmentem EcoRI 5,2 kb odpowiadającym nieaktywnemu (metylowanemu) chromosomowi X (ścieżki 1, 7, 18 i 27). Fragment 2,8 kb był nieobecny u mężczyzn z delikatną mutacją X, podczas gdy samice nosicieli mieli zarówno normalne fragmenty (2,8 i 5,2 kb), jak i zmutowane. Premutacje wykryto jako fragmenty EcoRI-EagI od 2,9 do około 3,3 kb u mężczyzn (ścieżka 3) i znaleziono je na aktywnym chromosomie X u samic (ścieżki 8, 24, 26 i tym podobne), podczas gdy 5,3-do-5,7 Fragmenty EcoRI -kb odpowiadały premutacji na nieaktywnym chromosomie X. Fragmenty odpowiadające pełnym mutacjom nie były trawione przez EagI, a zatem pojawiły się jako pojedyncze lub heterogenne prążki powyżej 5,7 kb (ścieżki 10, 12, 15 i podobne). Przypadki mozaiki pojawiły się jako mieszanina pełnej (metylowanej) mutacji i niemetylowanej premutacji (ścieżki 20 i 21). Stanowiły one większość przypadków niepełnej metylacji opisywanej wcześniej u samców z zespołem łamliwego chromosomu X.17 Kilka osób miało częściowo niemetylowany, raczej jednorodny prążek ze wzrostem w zakresie od 600 do 1000 pz. Ten wzór został opisany jako mozaikowatość metylacji .
Nowe spostrzeżenia w analizie delikatnych rodowodów X.
Rysunek 4. Rysunek 4. Transmisja Mutacji Delikatnych X w trzech rodzinach. Przed bezpośrednią diagnozą DNA za pomocą StB12.3, identyfikacja genotypów w kruchym locus X (FRAXA) została wywiedziona z analizy rodowodu, analizy cytogenetycznej i segregacji polimorficznych markerów DNA (CYT + SEG). Dane te są przedstawione dla każdego przedmiotu w Rodzinie A (znak plus oznacza przewoźnika, a znak zapytania – brak wniosków). Wyniki bezpośredniej diagnostyki DNA przedstawiono dla wszystkich trzech rodzin w następujący sposób: DX oznacza wzór mutacji, normalny NOR, premumatyzowany PRE, całkowicie zmutowany PEŁNA, mozaika metylacji MeMOS, . (kb) wzrost wielkości jednorodnego fragmentu, oraz Ja poziom metylacji (znak plus oznacza w pełni metylowany, a znak minus brak metylacji)
[więcej w: feksofenadyna, nieulotne cda, niedoczynność tarczycy a depresja ]