Diagnoza bezpośrednia za pomocą analizy DNA zespołu łamliwego chromosomu Q umysłowego opóźnienia cd

Sondy, które hybrydyzowały z DNA sąsiadującym z tą wyspą, takie jak StB12.3, umożliwiają wykrycie mutacji za pomocą analizy Southern blot genomowego DNA strawionej różnymi enzymami restrykcyjnymi 17, 19. Jako kompromis spośród nich wybraliśmy EcoRI dla niezawodne wykrywanie różnych typów mutacji opisanych poniżej. Dla optymalnej analizy proponujemy jednak zastosowanie podwójnego skrócenia zarówno z EcoRI, jak i EagI, co pozwala na wykrycie mutacji i określenie statusu metylacji w jednym teście. Metoda ta została przetestowana na DNA leukocytów, próbkach biopsji kosmków kosmówkowych i amniocytach. Trawienie przez EcoRI
Ryc. 2. Ryc. 2. Wykrywanie Mutacji Delecyjnych X w DNA EcoRI. DNA leukocytów zostało w pełni strawione EcoRI. Strzałki wskazują rozmiary normalnego fragmentu (5,2 kb) i niektóre zmutowane fragmenty. Po lewej stronie . odnosi się do wzrostu rozmiaru zmutowanego fragmentu. Symbole opisujące podmioty i ich związki rodzinne pojawiają się u góry. Kwadraty i koła reprezentują odpowiednio mężczyzn i kobiety. Niepogłosione symbole otwarte wskazują osoby, które wyglądały normalnie i nie były badane cytogenetycznie. W przypadku symboli podzielonych na dwie części, prawa strona reprezentuje częstotliwość kruchej strony X, a lewa – stopień upośledzenia umysłowego. Otwarte symbole podzielone na pół oznaczają zdrowych osobników bez zespołu łamliwego chromosomu X, wykluwane symbole z lekkim upośledzeniem umysłowym i wrażliwą ekspresją X w mniej niż 4 procentach komórek, a stałe symbole upośledzają umysłowo pacjentów z wrażliwą ekspresją X w> 4 procentach komórek. Symbole zawarte w trójkącie oznaczają próbki uzyskane od płodu. Symbole przedstawione linią przerywaną oznaczają osoby, dla których nie przedstawiono skrótu EcoRI, ale które są potrzebne do wyjaśnienia rodzinnej relacji innych osób. Próbka na ścieżce 22 ma bardzo słabe rozmazanie przy 7,5 kb w trawionym EcoRI. Ta plama jest bardziej widoczna jako prążek 14,3 kb w trawieniu Bg / II tej samej próbki, pokazanym po prawej stronie; pojawia się tuż nad normalnym fragmentem Bg / II, który ma długość 12 kb.
Wyniki trawienia DNA za pomocą EcoRI pokazano na rycinie 2. StB12.3 wykrył fragment EcoRI 5,2 kb u normalnych osób (ryc. 2, ścieżki 11 i 20). U mężczyzn z upośledzeniem umysłowym z zespołem łamliwego chromosomu X brakowało prawidłowego fragmentu i wykryto jedno lub więcej pasm w zakresie od 5,7 do 8 kb lub więcej (wzrost wielkości od 500 do ponad 3000 pz), co odpowiada pełnemu mutacja (ścieżki 14 i 15). Często widuje się wiele pasm, ponieważ pełna mutacja jest niestabilna w komórkach somatycznych. Różne komórki mogą przenosić fragmenty o różnych rozmiarach. Jeśli heterogeniczność jest rozległa, zmutowane fragmenty mogą pojawić się jako rozmaz 17, 19 (ścieżka 17). W męskich nośnikach pasmo o wielkości 5,2 kb zastąpiono generalnie homogennym fragmentem o wielkości 100 do 500 pz (premutacja, linia 5). W przypadku nosicieli fragment 5,2-kb pochodzący z prawidłowego chromosomu X był obecny razem z fragmentem lub fragmentami specyficznymi dla premutacji (ścieżki 2, 12 i 21) lub pełna mutacja (ścieżki 1, 9 i 13). U około 15 procent osób z pełną mutacją wykryto dodatkowy prążek charakterystyczny dla premutacji w zmiennej proporcji (ścieżki 19 i 22)
[patrz też: seminogram kraków, apteka internetowa rzeszów, witamina c lewoskrętna właściwości ]