Diagnostyka prenatalna zespołu łamliwego chromosomu X poprzez bezpośrednie wykrywanie niestabilnej sekwencji DNA

Zespół FRAGILE X jest najczęstszą postacią rodzinnego upośledzenia umysłowego1. Diagnostyka prenatalna opierała się na wykryciu cytogenetycznym kruchego chromosomu X w hodowanym płynie owodniowym, komórkach kosmówkowo-kosmkowych lub krwi płodowej uzyskanej przez kordocentezę. Częstość błędnego rozpoznania wynosi około 5 procent i wynika z rzadkich fałszywie dodatnich i częstszych fałszywie ujemnych diagnoz [2]. Podejście molekularno-genetyczne z wykorzystaniem polimorfizmów DNA związanych z miejscem wrażliwym jest możliwe do przeprowadzenia, ale wyniki są raczej probabilistyczne niż absolutnie diagnostyczne. .3, 4 Niedawno wykazano, że zespół łamliwego chromosomu X charakteryzuje się niestabilną sekwencją DNA, którą można wykryć za pomocą analizy Southern blot.5, 6. Zgłaszamy zastosowanie tego podejścia do ustalenia statusu nosicielstwa kobiety cytogenetycznie rodzina z zespołem łamliwego chromosomu X i zdiagnozowanie mutacji u płodu płci męskiej przez wykrycie niestabilnej sekwencji w DNA uzyskanym przez próbkowanie kosmówki-kosmówki. Opis przypadku
Rysunek 1. Rycina 1. Rodowód rodziny z zespołem łamliwego chromosomu X. Dane przedstawione poniżej symboli reprezentujących badane podmioty są następujące: górny rząd, numer tematu; drugi rząd, genotypy w locus DXS297 (ponumerowane arbitralnie w kolejności rosnącej wielkości); trzeci rząd, rozmiary pasm (w kilobazach) wykrywane za pomocą sondy pfxa3; dolny rząd, genotypy w locus DXS296, z S (powolnym) oznaczającym allel 10,9 kb i F (szybko) allelem 9,9 kb. N oznacza cytogenetycznie ujemny dla kruchego chromosomu X. Kręgi reprezentują samice, kwadraty samców i kształt diamentu badany płód. Otwarte symbole oznaczają przedmioty, których nie studiowano. Figura 2. Figura 2. Southern Blotting, po trawieniu przez PsfI, DNA leukocytów od członków rodziny, próbkę kosmówkowo-kosmówkową i tkanki otrzymane po zakończeniu ciąży. Blot sondowano jednocześnie pfxa3 i pS8. Ścieżki są oznaczone numerami używanymi do identyfikacji członków rodowodu na Rysunku 1. Dla płodu (III-4) zbadano trzy próbki: biopsję kosmówki i kosmówki w linii 1, próbki skóry i tkanki mięśniowej w linia 2 i kosmki uzyskane po zakończeniu ciąży na ścieżce 3.
Rodzina z zespołem łamliwego chromosomu X (ryc. 1) była znana od kilku lat, ale kobiety w drugim pokoleniu nie zażądały badań w celu ustalenia statusu nosiciela. Pacjent indeksowy (przedmiot II-5) przedstawił takie badania w styczniu 1991 r., Przed rozpoczęciem własnej rodziny. Genotypowanie rodziny z wysoce polimorficznym markerem mikrosatelitarnym w locus DXS2977 (powtórzenie Achéala) wykazało, że ta kobieta miała 96 procent ryzyka przeniesienia kruchego genotypu X.4 Badania cytogenetyczne nie wykazały obecności kruchego chromosomu X, ponieważ nie radzi sobie z więcej niż połową kobiet o normalnym stanie psychicznym, które są nosicielami. W marcu 1991 r. Pacjentka została przedstawiona w 9 tygodniu ciąży. Analiza Southern blot jej DNA za pomocą sondy pfxa3, która wykrywa niestabilną sekwencję DNA p (CCG) n, której amplifikacja jest charakterystyczna dla kruchej mutacji X, 5 potwierdziła, że była nośnikiem mutacji (ryc. 2) . Wykonano biopsję przezbrzuszną kosmówkowo-kosmówkową w 10 tygodniu ciąży i uzyskano około 30 mg kosmków.
[więcej w: larimax t, olx bystrzyca kłodzka, helimed katowice ]